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细胞凋亡形态学检测方法有哪些
发布时间:2022-04-23 点击次数:148次
  细胞主要的死亡方式有2种,包括细胞坏死和细胞凋亡,其中细胞坏死是很早就被发现的,而细胞凋亡是近年来被发现的,并且越来越被重视,最近几年也一直是非常的热门。
 
  这是因为,对于细胞凋亡的检测可以用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究,并且还能应用于临床诊疗,新药研制、生物制品开发、肿瘤放化疗、以及从促凋亡角度探索肿瘤的基因治疗,对相关疾病的早期发现、放化疗的疗效评价具有举足轻重的地位。
 
  细胞凋亡是指为维持内环境稳定,生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程,是程序性死亡过程的一种主要形式,它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞中断、内质网与细胞膜融合,终细胞片段化形成许多细胞凋亡体。
 
  形态学检测:
 
  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。
 
  1 光学显微镜和倒置显微镜检测:
 
  (1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。
 
  (2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋亡形态。
 
  2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜拍细(胞凋亡)结果:
 
  一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。
 
  3 透射电子显微镜观察:
 
  结果评判:凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构;Ⅱa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体。
 

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